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北京DNA鉴定紫外分光光度法

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北京DNA鉴定紫外分光光度法

北京DNA鉴定紫外分光光度法:DNA具有260nm紫外光吸收特征。在260nm紫外光下,吸光度值(A值)为l时相当于50yg/ml浓度的双链DNA,40yg/ml浓度的单链DNA溶液。北京DNA鉴定将提取的样本DNA溶解于0.Imol/L NaOH溶液中,使双链DNA分子变性为单链,经紫外分光光度计测定Az&o值,按照公式计算样本DNA的含量;

样本DNA浓度(弘g/mD =Az"o×40t.eg/mIX稀释倍数

紫外分光光度法还能够测定DNA液的纯度,一般蛋白质吸光波长是280nm.在测定样本DNA液AZ∞值的同时测定Azso值,然后计算A:。/Az船比值,若比值为1.8~2.1t说明样本DNA比较纯,若比值小于1.6,证实样本DNA液中含有过多的蛋白质杂质,需要重新纯化。该法多用于分子生物学实验窒,但在法医学领域较少采用·其主要缺点是难以对少量的DNA精确定量,不具有人类特异性,且样本中所含的其他化学物质·如衣服上的染料、骨骼样本中的腐殖酸等,具有干扰作用。